​小鼠5核苷酸酶elisa检测试剂盒操作步骤

小鼠5核苷酸酶elisa检测试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。

小鼠血管紧张素转化酶(mouse ACE)

小鼠雄激素结合蛋白(mouse ABP)

小鼠促肾上腺皮质激素(mouse ACTH)

小鼠Active Caspase-3

小鼠Active Caspase-7

小鼠Active Caspase-8

小鼠激活素A(mouse Activin A)

小鼠脂联素(mouse Adiponectin)

小鼠抗线粒体抗体(mouse AMA)

小鼠抗核抗体(mouse ANA)

小鼠血管紧张素II(mouse ANG II)

小鼠血管生成素-2(mouse Angiopoietin-2)

小鼠心钠素(mouse ANP)

小鼠凋亡诱导因子(mouse AIF)

小鼠抗利尿激素/血管加压素(mouse AVP/ADH)

小鼠醛固酮(mouse ALD)

小鼠白蛋白(mouse Albumin)

小鼠血管抑素(mouse Angiostatin)

小鼠载脂蛋白E(mouse APO E)

小鼠B淋巴细胞刺激因子(mouse BAFF)

小鼠凋亡因子BAX(mouse BAX)

小鼠细胞凋亡相关基因(mouse BCL-2)